Cameleon测钙系统在H202诱导的A549细胞凋亡过程中的应用

观察Cameleon测钙系统在H202诱导的A549细胞凋亡过程中的应用，实时测定胞浆Ca2＋浓度（[Ca2＋]i），并探讨[Ca2＋]I－与细胞凋亡和Pyk2磷酸化的关系。采用ca2＋指示器CameleonYC3．6转染A549细胞，24h后用50mmol／LH202刺激细胞。激光扫描共聚集显微镜实时测定选取细胞的[ca2＋]i变化。采用Westernblot检测H202刺激的细胞中Pyk2－tyr402磷酸化水平。采用DAPI染色试剂盒观察H2O2刺激后细胞凋亡情况。结果发现，在H2O2作用下，A549细胞胞浆内游离[Ca2＋]迅速升高，同时Pyk2－tyr402磷酸化水平显著升高俨〈O．05），凋亡细胞百分比显著增加（Ｐ〈0．01）。因此，H202促进A549细胞内Ca02＋释放，可能通过活化Pvk2诱导细胞凋亡。