| 大肠杆菌pqqL基因敲除与功能分析 |
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| 引用本文： | 熊向华,杨璐,韩晓东,汪建华,张惟材. 大肠杆菌pqqL基因敲除与功能分析[J]. 微生物学报, 2010, 50(10): 1380-1384 |
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| 作者姓名： | 熊向华 杨璐 韩晓东 汪建华 张惟材 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071 |
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| 基金项目： | 国家“863计划”（2006AA020303）；国家科技支撑计划项目（2007BAI46B01） |
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| 摘 要： | 【目的】通过构建大肠杆菌pqqL基因缺陷突变株,研究大肠杆菌pqqL基因的功能。【方法】首先通过PCR扩增得到pqqL基因和kan抗性基因,在体外构建线性打靶片段pqqL-kan-pqqL。然后通过Red同源重组敲除大肠杆菌的pqqL基因,构建大肠杆菌缺失突变体DH5αΔpqqL。在此基础上通过DCIP法检测山梨糖脱氢酶活性来比较大肠杆菌突变株与亲本株中PQQ合成的情况。【结果】成功敲除了大肠杆菌的pqqL基因,DCIP法检测结果显示大肠杆菌pBCP162/DH5αΔpqqL和pMD19T Simple-pqqABCDE/DH5α能够合成PQQ,而大肠杆菌pMD19T Simple-pqqABCDE/DH5αΔpqqL不能合成PQQ。【结论】大肠杆菌pqqL基因和pqqF基因具有同样的功能。
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| 关 键 词： | 关键词：吡咯喹啉醌；Red同源重组；基因敲除 |
| 收稿时间： | 2010-04-09 |
| 修稿时间： | 2010-04-30 |
Knockout and function analysis of pqqL gene in Escherichia coli |
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| Xianghua Xiong,Lu Yang,XiaoDong Han,JianHua Wang and WeiCai Zhang. Knockout and function analysis of pqqL gene in Escherichia coli[J]. Acta microbiologica Sinica, 2010, 50(10): 1380-1384 |
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| Authors: | Xianghua Xiong Lu Yang XiaoDong Han JianHua Wang WeiCai Zhang |
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| Affiliation: | Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China;Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China;Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China;Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China;Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Keywords: pyrroloquinoline quinone Red homologous recombination gene knockout |
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