马铃薯卷叶病毒P0蛋白抑制RNA沉默及其与AGO蛋白的相互作用 |
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引用本文: | 霍晓辉,申永梅,刘国富,曹雪松.马铃薯卷叶病毒P0蛋白抑制RNA沉默及其与AGO蛋白的相互作用[J].生物技术通报,2013(3):70-76. |
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作者姓名: | 霍晓辉 申永梅 刘国富 曹雪松 |
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作者单位: | 聊城大学生命科学学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(30870109) |
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摘 要: | 马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus,PLRV)P0是由开放阅读框1(ORF1)所编码,利用农杆菌介导的瞬时表达技术渗透注射转绿色荧光蛋白(GFP)基因的16c烟草叶片发现PLRV-P0能够抑制由GFP mRNA引起的基因沉默,结果表明PLRV-P0是马铃薯卷叶病毒编码的一个基因沉默抑制因子。通过序列分析发现PLRV-P0基因序列中含有两个重复的WG基序,我们将PLRV-P0基因序列中第87位和第140位的色氨酸(W)点突变为丙氨酸(A)(命名为P0WA),构建植物表达载体pCAMBIA1300-CE-P0,pCAMBIA1300-CE-P0WA,农杆菌渗透注射本氏(Nicotiana benthamiana)烟草叶片,通过荧光显微镜观察发现PLRV-P0和AGO共同注射后有绿色荧光出现而PLRV-P0WA和AGO共同注射后则没有绿色荧光出现。研究结果初步表明,PLRV-P0能够和AGO蛋白发生相互作用,重复的WG基序是其与AGO蛋白相互作用的关键氨基酸。
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关 键 词: | 马铃薯卷叶病毒(PLRV) P0蛋白 抑制RNA沉默 AGO蛋白 相互作用 |
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