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| 黑胸大蠊浓核病毒NS2蛋白的表达、抗体制备及亚细胞定位 | |
| 引用本文： | 杨 波,余沛然,蔡大威,董晓敏,刘志刚,胡 征,张珈敏,胡远扬.黑胸大蠊浓核病毒NS2蛋白的表达、抗体制备及亚细胞定位[J].微生物学通报,2009,36(9):1443-1448. |
| 作者姓名： | 杨 波 余沛然 蔡大威 董晓敏 刘志刚 胡 征 张珈敏 胡远扬 |
| 作者单位： | 1. 湖北工业大学生物技术系,湖北,武汉,430068;武汉大学病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072 2. 武汉大学病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072 3. 湖北工业大学生物技术系,湖北,武汉,430068 |
| 基金项目： | 病毒学国家重点实验室开放研究基金资助项目(No. 2007001) |
| 摘 要： | ns2是黑胸大蠊浓核病毒的一个非结构基因, 所编码的蛋白质大小为30 kD, 是一个功能未知的基因。为了对该基因进行深入的功能研究, 从感染了黑胸大蠊浓核病毒的蟑螂的后肠组织中通过RT-PCR得到ns2基因编码序列, 将其构建于原核表达载体pET-28a, 转化大肠杆菌BL21(DE3) 获得融合表达产物。此融合蛋白经分离纯化后, 免疫新西兰大白兔, 制备其多克隆抗体。采用Western印迹技术, 用该抗体检测ns2基因的真核表达产物, 证明该抗体有较好的针对NS2蛋白的专一性, 可用于对NS2结构和功能的研究。同时, 将此编码序列克隆至果蝇细胞表达载体pAC, 得到重组质粒后转染果蝇S2细胞表达重组蛋白, 通过共聚焦显微镜用该抗体检测该蛋白在S2细胞中的亚细胞定位, 发现NS2蛋白主要定位于细胞质, 核内仅有少量分布。 |
| 关 键 词： | 黑胸大蠊浓核病毒 NS2蛋白 表达 亚细胞定位 |
Expression, Purification, Preparation of Polyclonal Antibody and Subcelluar Localization of the NS2 Protein of Periplaneta fuliginosa Densovirus |
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| YANG Bo,YU Pei-Ran,CAI Da-Wei,DONG Xiao-Min,LIU Zhi-Gang,HU Zheng,ZHANG Jia-Min and HU Yuan-Yang.Expression, Purification, Preparation of Polyclonal Antibody and Subcelluar Localization of the NS2 Protein of Periplaneta fuliginosa Densovirus[J].Microbiology,2009,36(9):1443-1448. | |
| Authors: | YANG Bo YU Pei-Ran CAI Da-Wei DONG Xiao-Min LIU Zhi-Gang HU Zheng ZHANG Jia-Min and HU Yuan-Yang |
| Institution: | Department of Biotechnology, Hubei University of Technology, Wuhan, Hubei 430068, China; State Key Laboratory of Virology, Wuhan University, Wuhan, Hubei 430072, China;State Key Laboratory of Virology, Wuhan University, Wuhan, Hubei 430072, China;State Key Laboratory of Virology, Wuhan University, Wuhan, Hubei 430072, China;State Key Laboratory of Virology, Wuhan University, Wuhan, Hubei 430072, China;Department of Biotechnology, Hubei University of Technology, Wuhan, Hubei 430068, China;Department of Biotechnology, Hubei University of Technology, Wuhan, Hubei 430068, China;State Key Laboratory of Virology, Wuhan University, Wuhan, Hubei 430072, China;State Key Laboratory of Virology, Wuhan University, Wuhan, Hubei 430072, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Periplaneta fuliginosa densovirus (PfDNV) NS2 protein Expression Subcelluar localization |
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