| 水稻线粒体tRNA^Trp突变体的克隆和氨酰化活力鉴定 |
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| 作者姓名： | 金晓玲 巩菊芳 刘雪梅 王晓红 张日清 |
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| 作者单位： | [1]中南林业科技大学环境艺术设计学院,长沙410004 [2]浙江师范大学化学与生命科学学院,金华321004 [3]中南林业科技大学资源与环境学院,长沙410004 |
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| 摘 要： | 为了研究tRNA^Trp的氨基酸接受茎中除两对半碱基以外的特异性元件，设计并完成了4种水稻线粒体tRNA^Trp向枯草杆菌tRNA^Trp的突变体（MPB0，G1A和U5G／A68C；MPB1，C2G／G71C；MPB2，C4G／G69C；MPB3，C2G／G71C和C4G／G69C），体外转录并用枯草杆菌和人这两种不同种属来源的色氨酰tRNA合成酶（TrpRS）N定了这些tRNA^Trp分子的氨酰化活力（Kcat／KM）．结果表明，这些突变体具有被枯草杆菌TrpRS氨酰化的能力，与野生型水稻线粒体tRNA^Trp相比，MPB0被枯草杆菌TrpRS氨酰化的活力提高了5倍，MPB1和MPB2被枯草杆菌TrpRS氨酰化的活力分别提高了40和53倍，MPB3则提高了140倍，为野生型枯草杆菌tRNA^Trp的34％，而人色氨酰tRNA合成酶氨酰化这4个突变体的活力都很微弱．揭示了水稻线粒体tRNA^Trp氨基酸接受茎上的2个碱基对C2／G71和C4／G69的突变，对枯草杆菌TrpRS的识别起重要作用，由此推测，接受茎上的2个碱基对C2／G71和C4／G69也是线粒体tRNA^Trp重要的特异性元件．
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| 关 键 词： | 水稻线粒体tRNA^Trp 色氨酰tRNA合成酶 氨酰化活力 突变体 |
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