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一株全基因合成耐热甘露聚糖酶的表达及酶学性质分析
引用本文:张巍,王亚伟,陈丰,周樱,熊海容.一株全基因合成耐热甘露聚糖酶的表达及酶学性质分析[J].中国生物工程杂志,2014,34(8):41-46.
作者姓名:张巍  王亚伟  陈丰  周樱  熊海容
作者单位:1. 中南民族大学生命科学学院 武汉 430074; 2. 武汉新华扬生物股份有限公司 武汉 430074
基金项目:湖北省对外科技合作项目(2013BHE016);武汉市科技攻关项目(2013020501010180)资助项目
摘    要:根据已知耐热甘露聚糖酶ManAd3氨基酸序列与毕赤酵母密码子使用偏爱性,设计并合成了甘露聚糖酶ManA全基因(Accession No.KJ806637),与表达载体pPIC9k重组后,转化毕赤酵母GS115,筛选获得重组菌株ManA-GS115。该重组菌株发酵产物经SDS-PAGE鉴定,其中甘露聚糖酶ManA含量达到电泳纯级别,分子量大小约为30 kDa。其酶学性质检测结果显示该酶最适反应温度为75℃,最适反应pH为6.0,比活力高达3200 IU/mg,并且在75℃下处理30 min仍能维持90%以上相对酶活力。该甘露聚糖酶ManA表达量较高,在偏酸性环境下仍能够维持较高的相对酶活力,且热稳定性显著,可广泛应用于食品、酿造、饲料、纺织和医药等工业领域。

关 键 词:甘露聚糖酶  毕赤酵母  基因合成  耐热性  
收稿时间:2014-07-11

Gene Synthesis,Expression and Characterization of a Thermostable Endo-β-1, 4-mannanase
ZHANG Wei,WANG Ya-wei,CHEN Feng,ZHOU Ying,XIONG Hai-rong.Gene Synthesis,Expression and Characterization of a Thermostable Endo-β-1, 4-mannanase[J].China Biotechnology,2014,34(8):41-46.
Authors:ZHANG Wei  WANG Ya-wei  CHEN Feng  ZHOU Ying  XIONG Hai-rong
Abstract:
Keywords:Mannanase  Pichia pastoris  Gene synthesis  Thermostability  
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