重组人gdnf乳腺特异表达载体转染牛胎儿成纤维细胞的研究 |
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引用本文: | 虞飞,李斌,张晶晶,丁海麦,张学明.重组人gdnf乳腺特异表达载体转染牛胎儿成纤维细胞的研究[J].生物技术通报,2014(8). |
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作者姓名: | 虞飞 李斌 张晶晶 丁海麦 张学明 |
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作者单位: | 内蒙古科技大学包头医学院; |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(31060304);内蒙古高等学校科学研究项目(NJ10184) |
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摘 要: | 为了制备重组人GDNF牛乳腺生物反应器,采用组织块贴壁法分离培养雌性牛胎儿成纤维细胞,连续继代培养75d,进行形态观察和染色体分析,在此基础上,转染带有新霉素抗性和红色荧光蛋白双重筛选标记的重组人gdnf乳腺特异表达载体pNR-GDNF,G418筛选阳性抗性克隆,进行PCR法鉴定。结果表明,分离培养的牛胎儿成纤维细胞具有正常的形态、分裂增殖特性和染色体数目;目的基因已整合到转基因细胞的染色体上。
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关 键 词: | 牛胎儿成纤维细胞 分离培养 转基因 GDNF |
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