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小鼠原核期受精卵体外培养系统的筛选
引用本文:淡新刚,董雅娟,柏学进,马保华,胡亮,杨恕玲,王雪红,董方圆.小鼠原核期受精卵体外培养系统的筛选[J].生物技术通报,2006(Z1):416-421.
作者姓名:淡新刚  董雅娟  柏学进  马保华  胡亮  杨恕玲  王雪红  董方圆
作者单位:1. 西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室,杨凌,712100;莱阳农学院动物胚胎工程中心,莱阳,265200
2. 莱阳农学院动物胚胎工程中心,莱阳,265200
3. 西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室,杨凌,712100
基金项目:山东省青岛市科技发展基金
摘    要:为了筛选出最佳的小鼠原核期受精卵的体外发育培养系统,分别进行了四个试验。试验I:在体外分别用自配的M16、mM16、KSOM、mKSOM、CZB进行体外发育培养,进而筛选出一种最佳的体外培养系统;试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分别:探讨了血清、PVA、rhLIF对小鼠胚胎发育的影响。结果,试验I中胚胎发育到2-细胞的比率差异不明显,但是在mM16和mKSOM中,发育到4-细胞的比率94.7%,90.7%(91/96;78/86)和发育到桑椹胚/囊胚的比率分别为78.1%,67.4%(75/96;58/86)均明显高于其他三种培养液;试验II用10?S代替M16中BSA时,胚胎的发育率均下降,即使在mM16中桑椹胚/囊胚率仅为4.8%(12/35)与对照组M16(40.5%)差异显著(p<0.05);试验Ⅲ用PVA取代mM16和mKSOM中的BSA其体外发育率显著下降,胚胎均无一例发育到桑椹胚/囊胚;试验Ⅳ:rhLIF能提高胚胎在体外的发育率可使mM16培养的胚胎囊胚率、囊胚脱出率分别达到84%(47/56)、39.2%(22/56)。结论:在不添减其他成分前提下,只在M16中添加0.1mMolEDTA、0.5mMol牛磺酸、1000IU/mlrhLIF便可获得84%的囊胚率,同时证明在M16或mM16添加血清都会降低其体外发育率;PVA还不能有效的取代mM16、mKSOM中的血清。

关 键 词:小鼠  原核期受精卵  体外培养  筛选

Filtration of Culture System in Vitro of Mouse Pronuclear Zygote
Dan Xingang,Dong Yajuan,Bai Xuejin,Ma Baohua,Hu Liang,Yang Shuling,Wang Xuehong,Dong Fangyuan.Filtration of Culture System in Vitro of Mouse Pronuclear Zygote[J].Biotechnology Bulletin,2006(Z1):416-421.
Authors:Dan Xingang  Dong Yajuan  Bai Xuejin  Ma Baohua  Hu Liang  Yang Shuling  Wang Xuehong  Dong Fangyuan
Abstract:
Keywords:Mouse Pronuclear zygote Culture in vitro Filtration
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