重组人核因子κB亚基p65在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化

将扩增得到的核因子（NF）κB亚基p65基因片段克隆至测序载体pGEM-T，测序验证该序列为预期目的片段后，再将该基因片段克隆至表达载体pGEX-4T2中，转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导表达，用GST蛋白亲和柱纯化融合蛋白p65／GST。Western印迹验证该蛋白具有NF—κB抗原活性。结果表明，构建了NF—κBp65／GST融合表达载体，并表达和纯化了NF—κBp65／GST融合蛋白，为进一步研究NF-κB的功能和筛选NF—κB拮抗分子奠定了基础。