TMSG-1基因功能的初步研究 |
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作者姓名: | 马春树 宁钧宇 由江峰 柳林 郑杰 方伟刚 王洁良 崔湘琳 吴秉铨 |
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作者单位: | 1. 北京大学医学部病理系,北京,100083 2. 北京大学医学部医药卫生分析中心,北京,100083 |
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基金项目: | 国家自然科学基金目资助项目(批准号:30170363),教育部科学研究重大项目(批准号:01003),国家重点基础研究发展规划资助项目(批准号:2002CB513100),国家“十五”科技攻关项目(批准号:2001BA703B05),北京大学211项目 |
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摘 要: | TMSG-1是用mRNA差异显示技术克隆的转移相关基因, 它在高转移肿瘤细胞系和有转移的肿瘤组织中表达下降. 以高转移的前列腺癌细胞系PC-3M-1E8为受体细胞, 通过基因转染技术观察了TMSG-1基因表达对细胞V-ATPase活性、细胞内pH值和细胞凋亡情况的影响, 同时利用GFP对TMSG-1细胞内定位进行了分析. 结果表明, V-ATPase在PC-3M-1E8细胞系, 转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系的活性无明显差异. 在转染正义TMSG-1的细胞系中, V-ATPase的活性比PC-3M-1E8细胞系, 转染空载体和转染反义TMSG-1细胞系均有明显增高(P < 0.001). 利用pH敏感性荧光探针BCECF测定细胞内的pH值, 结果显示转染正义TMSG-1组的pHi值有明显提高. 细胞凋亡的检测结果表明, 转染正义TMSG-1组细胞凋亡明显增多(P < 0.01), BCL2的表达显著下降. TMSG-1蛋白的细胞内定位分析表明, TMSG-1是一个跨膜蛋白, 定位于内质网、线粒体等细胞质膜系统. 实验结果表明, 前列腺癌细胞系中TMSG-1的上调可以提高细胞V-ATPase的活性, 增加细胞内的pH值, 同时TMSG-1的上调还可抑制BCL2的表达, 促进细胞凋亡的发生.
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关 键 词: | 基因转染 pH值 凋亡 前列腺癌 |
收稿时间: | 2002-09-16 |
修稿时间: | 2002-09-16 |
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