| 调宁蛋白T184的定点突变、表达、纯化和鉴定 |
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| 引用本文： | 曹圣,唐大椿,骆建云. 调宁蛋白T184的定点突变、表达、纯化和鉴定[J]. 生物化学与生物物理进展, 1999, 26(1): 35-38 |
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| 作者姓名： | 曹圣 唐大椿 骆建云 |
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| 作者单位： | 同济医科大学病理生理教研室,卫生部呼吸系疾病重点实验室,武汉,430030 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(39670833). |
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| 摘 要： | 为增强调宁蛋白对平滑肌收缩的抑制作用，用PCR重叠延长法使调宁蛋白基因中编码第184位苏氨酸的ACT突变为编码丙氨酸的GCC,将此PCR的突变产物装入到质粒载体pAED4后,转化至E.coli BL21(DE3)中, 构建的重组转化子用酶切和测序鉴定.诱导含有重组转化子的E.coli获得高效表达,经SDS-PAGE和蛋白质印迹鉴定后,采用反复冻融法及葡聚糖凝胶层析柱分离,初步纯化出调宁蛋白突变体T184A.
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| 关 键 词： | 调宁蛋白，定点突变，表达，纯化 |
| 收稿时间： | 1997-08-08 |
| 修稿时间： | : 1997-08- |
Construction, Expression and Purification of Calponin T184A:a Mutant of Calponin |
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| CAO Sheng,TANG Da-Chun and LUO Jian-Yun. Construction, Expression and Purification of Calponin T184A:a Mutant of Calponin[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 1999, 26(1): 35-38 |
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| Authors: | CAO Sheng TANG Da-Chun LUO Jian-Yun |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Pulmonary Disease, Health Ministry of China; Department of Pathophysiology, Tongji Medical University, Wuhan 430030, China;Key Laboratory of Pulmonary Disease, Health Ministry of China; Department of Pathophysiology, Tongji Medical University, Wuhan 430030, China;Key Laboratory of Pulmonary Disease, Health Ministry of China; Department of Pathophysiology, Tongji Medical University, Wuhan 430030, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant calponin site-directed mutation E.coli expression purification |
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