特异性eIF-4EsiRNA重组腺病毒构建及其对人卵巢癌细胞SKOV-3转移相关能力的影响 |
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作者姓名: | 茹晓莉 张凡 郭睿 于春梅 王凯 |
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作者单位: | [1]北京市垂杨柳医院,北京100022 [2]哈尔滨医科大学,黑龙江哈尔滨150001 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年项目(81101085);中国国家博士后面上项目(20100471019);黑龙江省教育厅项目(1251360);黑龙江省卫生厅项目(2009-173) |
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摘 要: | 目的:构建表达真核细胞起始因子-4E(eukaryoticinitiationfactor4E,eIF-4E)特异性siRNA的重组腺病毒载体,观察其对人卵巢癌细胞SKOV-3体外转移能力的影响。方法:应用基因重组技术将eIF.4EsiRNA序列构建于腺病毒载体pLP-Ade-X,经包装细胞包装后得到高滴度重组腺病毒pLP—Ade-4EsiRNA(psiE)。将腺病毒psiE感染SKOV.3细胞,用定量PCR进行elf.4E基因表达检测,然后应用transwell小室法观察对细胞侵袭和运动能力的影响,同时检测感染后细胞内VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果:病毒检测结果与预期相符,real—timePCR可检测到感染重组腺病毒psiE后SKOV.3细胞没有eIF-4E基因表达;病毒感染后transwell小室法检测到SKOV-3细胞的侵袭和运动能力均受到显著的抑制(均为P〈0.01);此外病毒感染的SKOV.3细胞中VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低。结论:封闭eIF-4E基因表达对人卵巢癌细胞SKOV.3的侵袭和运动都有抑制作用,其作用机制可能与VEGF、MMP-2、MMP-9表达相关。
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关 键 词: | eIF-4E 重组腺病毒 人卵巢癌细胞SKOV-3 侵袭和运动 VEGF |
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