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黑翅土白蚁基因组DNA提取方法的优化
引用本文:龙雁华,李娟,方志,杨云秋.黑翅土白蚁基因组DNA提取方法的优化[J].中国微生态学杂志,2013,25(8).
作者姓名:龙雁华  李娟  方志  杨云秋
作者单位:1. 安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥,230036
2. 安徽农业大学生物技术中心,安徽合肥,230036
3. 安徽农业大学茶与食品科技学院,安徽合肥,230036
基金项目:安徽省校省级科学研究项目"黑翅土白蚁共生真菌不同发育阶段基因表达谱的构建与分析",安徽农业大学稳定与引进人才项目,国家自然基金项目"茶尺蠖性信息素鉴定及其化学通讯研究"
摘    要:目的 为快速地提取到质量较好的黑翅土白蚁基因组DNA进行白蚁种群多样性的研究,对基因组DNA提取方法进行了比较与改进.方法 先初步采取CTAB法与蛋白酶K法对黑翅土白蚁基因组DNA的提取方法进行比较,再利用正交设计法对蛋白酶K法中裂解液、蛋白酶、RNA酶及作用时间4个因素进行优化.结果 蛋白酶K法获得的基因组DNA的质量与产量稍优于CTAB法;较佳的提取步骤组合为:裂解液150 μL,蛋白酶K 6μL,作用时间1h,RNA酶可不添加.结论 采用优化后的方法获得的基因组DNA为模板进行PCR扩增,得到了清晰、稳定的扩增谱带,完全可用于相关后续实验.

关 键 词:黑翅土白蚁  基因组DNA  提取方法  优化

The optimization of extraction method for genomic DNA of Odontotermes formosanus
Abstract:
Keywords:Odontotermes formosanus  Genomic DNA  Methods of extraction  Optimization
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