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| 丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其应用 | |
| 引用本文： | 郭敏利,朴永哲,王世全,黄玮,周华成,杨洪泽,唐丽娜. 丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其应用[J]. 中国微生态学杂志, 2013, 25(7) |
| 作者姓名： | 郭敏利 朴永哲 王世全 黄玮 周华成 杨洪泽 唐丽娜 |
| 作者单位： | 1. 大连工业大学生物工程学院,辽宁大连116034;大连民族学院生物工程系,辽宁大连 116600 2. 大连民族学院生物工程系,辽宁大连,116600 3. 大连工业大学生物工程学院,辽宁大连,116034 4. 河北华荣制药有限公司,河北石家庄,050041 |
| 摘 要： | 目的 丙酸杆菌基因敲除体系的构建及其验证.方法 利用PCR技术扩增丙酸杆菌hemE基因上、下游约500 bp左右片段,构建由上下游同源臂及hygB抗性基因组成的打靶质粒pPK705-arms-hygB.将打靶质粒转入丙酸杆菌感受态细胞,利用同源重组技术定向敲除hemE基因,并通过连续传代培养,消除外源质粒.最后,利用PCR技术验证丙酸杆菌染色体和打靶质粒发生同源重组.结果 成功敲除了丙酸杆菌hemE基因.结论 打靶质粒pPK705-arms-hygB能够与宿主基因组DNA发生重组,对稳定地改善其整个代谢途径的研究奠定了方法学基础. |
| 关 键 词： | 丙酸杆菌 VB12 基因敲除 |
Construction and application of a vector for gene deletion in Propionibacterium freudenreichii |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Propionibacterium VitaminB12 Gene knockout |
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