过量表达的hTR75可独立介导hTNFα的细胞毒性 |
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作者姓名: | 方佳 朱蓓 王德宝 陈常庆 |
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作者单位: | 中国科学院上海生物工程研究中心!上海200233,中国科学院上海生物工程研究中心!上海200233,中国科学院上海生物化学研究所,分子生物学国家重点实验室!上海200031,中国科学院上海生物工程研究中心!上海200233 |
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摘 要: | 利用细小RNA 病毒属脑炎和心肌炎病毒(EMCV)的内核糖体进入位点(IRES)元件构建了人肿瘤坏死因子受体75 基因(hTR75) 和新霉素抗性基因(neoR)的双顺反子表达载体, 通过电脉冲转染BHK21 细胞, 筛选出分别和同时稳定过量表达两种hTNF受体的细胞株。这些细胞在mRNA 和蛋白质水平均可检测到hTR75 的表达。利用野生型和具有两种受体选择性结合活性的hTNFα突变体对这些细胞株进行测定, 发现过量表达的hTR75 可以独立地介导hTNFα对BHK21 细胞的细胞毒性, 而hTR55 的存在并不能显著增强这种作用。上述结果为进一步阐明TR75 的功能以及两种受体间的相互作用提供了一条新的途径。
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关 键 词: | 人肿瘤坏死因子受体 内核糖体进入位点 表达 信号转导 |
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