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人神经生长抑制因子β结构域的高效表达及性质研究
作者姓名:沈炯  吴大庆  李令媛  茹炳根
作者单位:北京大学生命科学学院!北京100871
摘    要:神经生长抑制因子( G I F)是一种特异存在于哺乳动物脑中的金属硫蛋白(m etallothionein, M T)类似物,又称 M T Ⅲ.它与 M T 有相同的结合 Zn(Ⅱ), Cd(Ⅱ), Cu(Ⅰ)等金属的能力,但与 M T 不同的是它能够抑制神经细胞的生长,并发现在患 Alzheim er disease( A D 症)病人的大脑中 G I F蛋白量和m R N A 的量均显著下降,研究证明 G I F对神经细胞的抑制活性主要存在于其 β结构域中.为进一步研究 β结构域结构和功能的关系,将 β结构域的 c D N A 克隆入融合表达载体p G E X 4 T 1 中, I P T G 诱导并高效表达了 β结构域蛋白,通过氨基酸组成和质谱的测定,证明得到了目的蛋白.利用金属重组的方法,分别得到了结合 Cd 和 Zn 的 G I F 的 β结构域,并测定了其巯基和金属含量对蛋白量的比值,证明所得 G I F β与 M T β在结合金属能力上十分相似.用紫外光谱学的研究表明, Cd M T 的 β结构域在250 nm 处比 Cd G I F 的 β结构域有一明显肩峰,从而表明二者的金属—巯基结合簇的结构有明显不同,而这种结构上的差异有可能导致二者在功能上的不同.

关 键 词:神经生长抑制因子  β结构域  表达  性质  
收稿时间:1999-08-20
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