人尿激酶原基因在大肠杆菌中的高效表达

本文用ＰＣＲ方法对人工合成的尿激酶原ｃＤＮＡ基因５＇端进行改造，将之克隆到表达载体ｐＫＫ２３３－２中，转化大肠杆菌ＪＡ２２１，经ＩＰＴＧ诱导，获得了占总菌体蛋白１５％的高表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ结果显示表达产物主要为单链尿激酶，并且在菌体内基本上以无活性的包含体形式存在，经体外变复性，从１升培养基中可获得３０００００单位的活性尿激酶原。