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| 鹅细小病毒vp2基因片段在原核系统中的表达及多克隆抗体的制备 | |
| 引用本文： | 侯秋莲,王静,刘胜旺,孔宪刚,韩宗玺,冉多良.鹅细小病毒vp2基因片段在原核系统中的表达及多克隆抗体的制备[J].中国病毒学,2005,20(4):383-387. |
| 作者姓名： | 侯秋莲 王静 刘胜旺 孔宪刚 韩宗玺 冉多良 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;新疆农业大学动物医学学院,新疆,乌鲁木齐,830052 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 新疆农业大学动物医学学院,新疆,乌鲁木齐,830052 |
| 摘 要： | 根据鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)中国分离株HG5/82基因序列,设计引物,利用PCR技术扩增出HG5/82株vp2基因,将其克隆到pMD18-T载体后,转化入感受态细胞TG1中增殖.筛选阳性质粒,将其与原核表达载体pPROEXTMHTb分别用Nco Ⅰ酶切后回收目的片断,进行定向连接,产物转化入感受态DH5α,重组质粒经酶切和测序证实目的基因正确克隆到表达载体的预期位点且插入方向正确,构建了含有HG5/82主要结构基因vp2 5'端969bp片段的原核表达载体.经IPTG诱导后表达出与预期大小相符的约36kDa的融合蛋白,表达形式为包涵体.薄层扫描结果表明表达产物约占菌体总蛋白的21.4%.包涵体通过6mol/L盐酸胍裂解后,利用镍离子亲和树脂进行纯化,用纯化的分子量为36kDa的融合蛋白免疫新西兰白兔,制备兔抗鹅细小病毒部分结构蛋白多克隆抗体.Western blot分析表明该多克隆抗体与HG5/82毒株具有反应性,说明该融合蛋白具有抗原性. |
| 关 键 词： | 鹅细小病毒 vp2基因 克隆 表达 多克隆抗体 |
| 文章编号： | 1003-5125(2005)04-0383-05 |
| 修稿时间： | 2005年1月4日 |
Expression of the vp2 Gene Fragment of Goose Parvovirus in Prokaryotic System and Preparation of its Antiserum |
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| HOU Qiu-lian,WANG Jing,LIU Sheng-Wang,KONG Xian-gang,HAN Zong-xi,RAN Duo-liang.Expression of the vp2 Gene Fragment of Goose Parvovirus in Prokaryotic System and Preparation of its Antiserum[J].Virologica Sinica,2005,20(4):383-387. | |
| Authors: | HOU Qiu-lian WANG Jing LIU Sheng-Wang KONG Xian-gang HAN Zong-xi RAN Duo-liang |
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