摘 要: | 应用PCR技术,分别扩增拟康氏木霉(T.pseudokoningii S38)和微紫青霉(P.janthinellumAs3.510)Cbh1启动子的284 bp和215 bp两个片段,并通过凝胶阻滞试验,初步分析了在槐糖和葡萄糖两种培养条件下Cbh1启动子上参与Cbh1基因表达的调控信息.凝胶阻滞试验结果表明,S38 Cbh1启动子片段与葡萄糖和槐糖培养/诱导条件下的无细胞提取物,均形成了蛋白质-DNA复合物,而As3.510,只有葡萄糖培养条件下的无细胞提取物与其启动子片段,形成了蛋白质-DNA复合物.表明在S38 Cbh1启动子的一302/一18 bp处,可能存在与槐糖和葡萄糖介导的调控蛋白相互作用的特定核酸基元,而在As3.510 Cbh1启动子上的一280/一65 bp处有与葡萄糖介导的阻遏蛋白相互作用的特定核酸基元.竞争性阻滞试验结果表明,S38和As3.510 Cbh1启动子片段与胞内调控蛋白的相互作用是特异性的.
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