双通道TaqMan实时荧光PCR应用于别嘌呤醇不良反应相关基因HLA-B*58:01的检测与验证

摘要 目的：建立一种双通道TaqMan实时荧光PCR方法，应用于别嘌呤醇不良反应相关基因HLA-B*58:01的快速基因检测，并验证该方法的灵敏度、特异性、重复性及可靠性等性能指标。方法：针对HLA-B*58:01 等位基因序列设计引物和Taqman 探针，建立一种双通道TaqMan实时荧光PCR检测方法，收集陕西省人民医院、浙江大学医学院附属第二医院、浙江大学医学院附属邵逸夫医院三家医院收治的1158例临床诊断为痛风或血清尿酸高患者的外周血标本，采用双盲对照实验，分别采用双通道TaqMan实时荧光PCR法与已获审批的商业试剂盒共同检测所有标本，对比两种方法的检测结果进而评价该TaqMan实时荧光PCR方法的临床性能。结果：双通道TaqMan实时荧光PCR法特异性高，稳定可靠，可检测低至1 ng/?滋L的阳性样本；采用双通道TaqMan实时荧光PCR法与已获审批的商业试剂盒在1158份患者标本中检出的HLA-B*58:01阳性及阴性标本均相同，阳性标本147例，阴性标本1011例，该组患者HLA-B*58:01基因携带率为12.69%，两种方法符合率为100%（1158/1158），两组实验结果数据采用SPSS分析P=1.000，差异无统计学意义。所有受检者HLA-B* 58:01携带率为12.69 % （147 /1158）。结论：双通道TaqMan实时荧光PCR可以作为一种快速、特异、灵敏的HLA-B*58:01的基因检测方法，用于别嘌呤醇用药前的相关不良反应风险评估。

Detection and Validation of Allopurinol Adverse Reaction Related Gene HLA-B * 58:01 by Dual Channel TaqMan Real-Time Fluorescent PCR