| 人乳头瘤病毒L1基因与丹毒丝菌SpaA-N优势抗原表位序列的嵌合重组质粒构建及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 庆格乐图,杨薇薇,晏鹏飞,苏幼红,李江伟. 人乳头瘤病毒L1基因与丹毒丝菌SpaA-N优势抗原表位序列的嵌合重组质粒构建及活性鉴定[J]. 生物技术通报, 2011, 0(10) |
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| 作者姓名： | 庆格乐图 杨薇薇 晏鹏飞 苏幼红 李江伟 |
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| 作者单位： | 新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室,乌鲁术齐,830046 |
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| 基金项目： | 新疆自治区高校科研计划重点项目(XJEDU2005105) |
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| 摘 要： | 为确定丹毒丝菌表面保护性抗原A的N-末端(SpaA-N)优势抗原表位,研发新型表位DNA嵌合疫苗,利用生物信息学软件对丹毒丝菌SpaA-N的优势B细胞抗原表位进行预测,以重叠PCR将优势表位插入人乳头瘤病毒16型的主要衣壳蛋白( HPV-16 LI) HI环结构的编码序列中,构建获得重组嵌合质粒pcDNA3-HPV-LI -△spaA.该重组质粒经体内、外瞬时特染后,RT-PCR均扩增获得了1 500 bp左右的目的片段.免疫印迹试验显示,体外转染嵌合质粒的细胞总蛋白能够与GST-SpaA-N重组蛋白免疫血清在56 kD处产生特异性结合.ELISA分析显示嵌合质粒可在小鼠体内产生差异显著的特异性抗体(P＜0.01),抗体滴度为1:1 000.此外,pcDNA3-HPV-L1-△spaA制备的抗血清至少可在1∶10稀释度条件下,介导外源补体对半数以上的菌体进行杀伤.该研究表明,获得的SpaA-N表位DNA嵌合疫苗具有免疫活性,为研发安全有效的丹毒丝菌新型DNA疫苗提供了一个新思路.
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| 关 键 词： | 丹毒丝菌 SpaA-N 表位预测 HPV-16 L1 嵌合质粒 瞬时表达 杀菌活性 |
Construction and Active Identification of Recombinant Plasmid with Chimeric Human Papillomavirus Type 16 L1 Expressing an Epitope of Erysipelothrix rhusiopathiae SpaA-N |
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| Qinggeletu,Yang Weiwei,Yah Pengfei,Su Youhong,Li Jiangwei. Construction and Active Identification of Recombinant Plasmid with Chimeric Human Papillomavirus Type 16 L1 Expressing an Epitope of Erysipelothrix rhusiopathiae SpaA-N[J]. Biotechnology Bulletin, 2011, 0(10) |
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| Authors: | Qinggeletu Yang Weiwei Yah Pengfei Su Youhong Li Jiangwei |
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| Affiliation: | Qinggeletu Yang Weiwei Yan Pengfei Su Youhong Li Jiangwei(Key Laboratory of Molecular Biology,Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering,College of Life Science and Technology,Xinjiang University,Urumqi 830046) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Erysipeolothrix rhusiopathiae SpaA-N Epitope prediction HPV-16 L1 chimeric plasmid Transient expression Bactericidal assay |
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