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| MNDA及MNDA-HIN200片段在大肠杆菌中克隆、表达及纯化 | |
| 引用本文： | 李智,刘勇,郑晓峰,张飞云.MNDA及MNDA-HIN200片段在大肠杆菌中克隆、表达及纯化[J].生物技术通报,2011,0(8). |
| 作者姓名： | 李智 刘勇 郑晓峰 张飞云 |
| 作者单位： | 1. 首都师范大学生命科学学院,北京100048;北京大学生命科学学院,北京100871 2. 北京大学生命科学学院,北京,100871 3. 首都师范大学生命科学学院,北京,100048 |
| 摘 要： | MNDA蛋白是与免疫反应相关的HIN-200家族成员之一,可作为模式识别受体来识别外源性双链DNA,它在人类免疫性疾病中发挥重要作用.通过PCR扩增获得的MNDA全长cDNA和MNDA-H1N200基因片段克隆到原核表达载体pET-28a中,使其N端带有一个His标签,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株,经IPTG诱导后,分别经过亲和层析和分子筛层析对MNDA和MNDA-HIN200进行纯化.DNA测序表明,构建的重组质粒正确,筛选了蛋白最适表达菌株BI21(DE3)；由于PYD(88aa)结构域之间的相互作用影响MNDA的表达量度聚集状态,因此设计了PYD缺失的只含有HIN-200结构域的突变体MNDA-HIN200,最终获得了大量的、均一性好、高纯度的MNDA-HIN200蛋白,为MNDA的蛋白的晶体筛选和结构解析奠定基础. |
| 关 键 词： | MNDA HIN-200 基因克隆 原核表达 纯化 |
Cloning, Expression and Purification of MNDA and MNDA-HIN200 Truncation in E.coli |
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| Li Zhi,Liu Yong,Zheng Xiaofeng,Zhang Feiyun.Cloning, Expression and Purification of MNDA and MNDA-HIN200 Truncation in E.coli[J].Biotechnology Bulletin,2011,0(8). | |
| Authors: | Li Zhi Liu Yong Zheng Xiaofeng Zhang Feiyun |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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