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木糖异构酶基因xylA的克隆及其表达载体的构建
引用本文:孙磊,张国军,闫爱玲,徐海英.木糖异构酶基因xylA的克隆及其表达载体的构建[J].生物技术通报,2011(7).
作者姓名:孙磊  张国军  闫爱玲  徐海英
作者单位:北京市农林科学院林业果树研究所,北京,100093
基金项目:现代农业产业技术体系建设专项资金项目,北京市优秀人才培养资助项目
摘    要:木糖异构酶基因xylA是一种正向选择标记基因,在植物基因工程中使用该标记可以获得安全的转基因植物.构建了以xylA基因为选择标记的植物表达载体.从大肠杆菌Top10中扩增出xylA基因,插入到质粒pCAMBIA2301的Xho Ⅰ位点,通过酶切和PCR检测插入片段的正确性,得到载体pCAMBIA2301-xylA,将pBI121载体上的‘35S-GUS-Nos'表达框插入到pCAMBIA2301-xylA的EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ位点.得到中间载体pCAMBIA2301-xylA-GUS,用Sac Ⅰ和Sma Ⅰ切下克隆载体上的CBF1基因替代pCAMBIA2301-xylA-GUS中的GUS片段,用电转化法将获得的表达载体转化到农杆菌中,为将来获得安全的转基因抗寒植株奠定基础.

关 键 词:木糖异构酶基因  标记基因  植物表达载体  克隆

Cloning of xylA Gene and Construction of Its Plant Expression Vector
Sun Lei,Zhang Guojun,Yan Ailing,Xu Haiying.Cloning of xylA Gene and Construction of Its Plant Expression Vector[J].Biotechnology Bulletin,2011(7).
Authors:Sun Lei  Zhang Guojun  Yan Ailing  Xu Haiying
Abstract:
Keywords:
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