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腺病毒介导的人抑瘤素M基因对A375人黑色素瘤细胞的抑制作用
引用本文:张凤娟,杨吉成,盛伟华,王家融,缪竞诚. 腺病毒介导的人抑瘤素M基因对A375人黑色素瘤细胞的抑制作用[J]. 中国生物工程杂志, 2011, 31(11): 24-30
作者姓名:张凤娟  杨吉成  盛伟华  王家融  缪竞诚
作者单位:苏州大学基础医学与生物科学学院 细胞生物学系 苏州 215123
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81001016)
摘    要:目的:构建抑瘤素M(OSM)重组腺病毒载体,研究其对人黑色素瘤细胞A375的抑制作用。方法:以PEGZ-OSM重组质粒为模板,通过PCR技术扩增出OSM片段,采用腺病毒载体的基因重组和体外包装技术获得表达与人OSM氨基酸序列相同的重组腺病毒子Ad-OSM,感染A375细胞,用荧光显微镜、RT-PCR、Western blot法检测OSM在A375细胞中的转录和表达;荧光显微镜观察A375细胞的形态学改变;MTT法和流式细胞术(FCM)检测Ad-OSM对A375细胞的生长抑制和细胞周期的抑制效应;半定量RT-PCR法检测OSM基因表达对A375细胞中的Bax、Bcl-2基因表达的影响。结果:基因测序和PCR分析结果显示,成功构建了Ad-OSM腺病毒表达载体;RT-PCR和Western blot法检测到OSM基因在A375细胞中的转录和表达;OSM基因的表达对A375细胞增殖有明显抑制作用,并可诱导细胞凋亡,OSM基因可通过上调细胞中Bax和下调Bcl-2基因表达诱导细胞凋亡。结论:成功构建了Ad-OSM腺病毒表达载体,感染OSM基因可明显抑制A375人黑色素瘤细胞的生长,诱导其凋亡,该现象可能是通过改变Bax、Bcl-2基因表达水平来发挥抗肿瘤作用。

关 键 词:抑瘤素OSM  腺病毒载体  构建  黑色素瘤  凋亡  
收稿时间:2011-06-07
修稿时间:2011-07-05

The Growth-inhibitory Effect of Recombinant OSM-Adenovirus on A375 Melanoma Cells
ZHANG Feng-juan,YANG Ji-cheng,SHENG Wei-hua,WANG Jia-rong,MIAO Jing-cheng. The Growth-inhibitory Effect of Recombinant OSM-Adenovirus on A375 Melanoma Cells[J]. China Biotechnology, 2011, 31(11): 24-30
Authors:ZHANG Feng-juan  YANG Ji-cheng  SHENG Wei-hua  WANG Jia-rong  MIAO Jing-cheng
Affiliation:(Department of Cell Biology,School of Biology & Basic Medical Sciences,Medical College of Soochow University,Suzhou 215123,China)
Abstract:
Keywords:Oncostatin M  Adenovirus vector  Construction  Melanoma  Apoptosis
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