| 基于简并引物同步克隆两个红麻PDIL同源基因cDNA5'-末端序列 |
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| 引用本文： | 金刚,陈鹏,唐向民,周瑞阳. 基于简并引物同步克隆两个红麻PDIL同源基因cDNA5'-末端序列[J]. 生物技术通报, 2011, 0(10) |
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| 作者姓名： | 金刚 陈鹏 唐向民 周瑞阳 |
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| 作者单位： | 广西大学植物遗传育种重点实验室,南宁,530005 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30900912,31060199); 国家麻类产业技术体系建设专项资金项目(nyctx-19-E16) |
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| 摘 要： | 探索利用同一套简并引物结合通用引物同步扩增两个红麻PDIL同源基因的cDNA5’-末端序列,以期为同一转录组中两个旁系同源基因cDNA5' RACE的同步扩增提供借鉴.通过红麻HcPDIL5-2a和HcPDIL5-2b cDNA中间片段及3’-末端已知序列的比时,在其完全保守区段设计了一条引物用于两个基因5' RACE的共反转录；在其部分保守区段设计了两条简并引物,并利用其在两个基因的5'RACE扩增时退火温度的差异,结合通用引物巢式PCR同步扩增两个基因的cDNA 5 ’-末端未知序列.在两个基因全长cDNA拼接序列的基础上设计两对特异引物分别扩增它们的cDNA全长序列,测序结果进一步验证了序列拼接和cDNA 5' RACE同步扩增的可靠性.进化分析证实两个基因属于PDIL基因家族成员.
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| 关 键 词： | 红麻 简并引物 5'RACE 同步克隆 |
Synchronous Cloning of 5' cDNA End of Two PDIL Homologous Gene from Kenaf( Hibiscus cannabinus L.) Using Degenerate Primers |
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| Jin Gang,Chen Peng,Tang Xiangmin,Zhou Ruiyang. Synchronous Cloning of 5' cDNA End of Two PDIL Homologous Gene from Kenaf( Hibiscus cannabinus L.) Using Degenerate Primers[J]. Biotechnology Bulletin, 2011, 0(10) |
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| Authors: | Jin Gang Chen Peng Tang Xiangmin Zhou Ruiyang |
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| Affiliation: | Jin Gang Chen Peng Tang Xiangmin Zhou Ruiyang(Provincial Key Laboratory of Plant Genetics & Breeding,Guangxi University,Nanning 530005) |
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