| 新型基因重组α-半乳糖苷酶工程菌菌种稳定性研究 |
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| 引用本文： | 高红伟,李素波,艾雪,李妙,王颖丽,让文亮,季守平,宫锋.新型基因重组α-半乳糖苷酶工程菌菌种稳定性研究[J].生物技术通报,2011(7). |
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| 作者姓名： | 高红伟 李素波 艾雪 李妙 王颖丽 让文亮 季守平 宫锋 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院野战输血研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 观察脆弱类杆菌来源的新型重组α-半乳糖苷酶工程菌菌株的遗传稳定性.在有选择压力(Kan+)条件下,将重组α-半乳糖苷酶工程菌菌株在LB固体培养基上采用划线法连续传60代,每隔20代取样保存菌种,最后同时进行菌体形态、生长速度和抗生素抗性、平板传代及诱导过程中的质粒稳定性、限制酶切图谱、测序、表达量和酶活力检测.结果表明细菌形态、生长速度和抗生素抗性等与原始种子库无明显差异；LB固体培养基上传60代后质粒稳定性接近100％,但诱导过程中质粒易丢失.第20、40和60代提取质粒进行酶切检查,酶切图谱没有改变.DNA测序未见α-半乳糖苷酶基因变异.原代菌株及第20、40和60代菌株经诱导培养,其α-半乳糖苷酶表达水平、酶活力及菌体蛋白的SDS-PAGE图谱均无明显差异.说明α-半乳糖苷酶工程菌株在平板传代中具有良好的遗传稳定性
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| 关 键 词： | 重组α-半乳糖苷酶 遗传稳定性 传代 |
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