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Th表位修饰的BLyS突变体的构建及活性分析
引用本文:高会广 府伟灵 李蓉芬 陈麟凤 邢效如 张艳 何凤田. Th表位修饰的BLyS突变体的构建及活性分析[J]. 中国生物工程杂志, 2005, 25(10): 1-6
作者姓名:高会广 府伟灵 李蓉芬 陈麟凤 邢效如 张艳 何凤田
作者单位:1. 第三军医大学西南医院检验科, 重庆 400038;2. 第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 重庆 400038
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30370319,30400187,30271228)
摘    要:在已克隆可溶性BLyS(sBLyS)cDNA的基础上,经PCR构建了其缺失不同区域的突变体(msBLyS)cDNA,然后将msBLyScDNA与卵清蛋白(ovalbumin,OVA)Th表位DNA序列重组,测序正确后分别克隆于原核表达载体pQE80L,并转化E.coliDH5α,经IPTG诱导后,融合蛋白以包涵体的形式表达,表达量均在菌体总蛋白的30%以上。包涵体经洗涤、溶解并经Ni-NTA层析纯化后,目的蛋白的纯度均在90%以上。活性检测发现,所获重组蛋白均丧失了sBLyS所具有的生物学功能,这些工作的完成为进一步探讨其治疗作用打下了基础。

关 键 词:B淋巴细胞刺激因子  突变体  活性分析  
收稿时间:2005-01-18
修稿时间:2005-04-25

Construction and Biological Activity Analysis of Mutant BLyS Modified by T-helper Epitope
GAO Hui-guang, FU Wei-ling, LI Rong-fen, CHEN Lin-feng, XING Xiao-ru, ZHANG Yan, HE Feng-tian. Construction and Biological Activity Analysis of Mutant BLyS Modified by T-helper Epitope[J]. China Biotechnology, 2005, 25(10): 1-6
Authors:GAO Hui-guang   FU Wei-ling   LI Rong-fen   CHEN Lin-feng   XING Xiao-ru   ZHANG Yan   HE Feng-tian
Affiliation:1. Analytical Department, Southwest Hospital, Third Military Medical University Chongqing 400038, China;2. Department of Biochemistry and Molecular Biology, Third Military Medical University Chongqing 400038, China
Abstract:
Keywords:B-lymphocyte stimulator Mutant Biological activity analysis
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