抗肿瘤肽QX3-1融合蛋白在大肠埃希菌中表达条件的优化 |
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作者姓名: | 费迎心 陈豪 李慧婷 吴文惠 王春晓 |
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作者单位: | 上海海洋大学 食品学院,上海 201306,上海海洋大学 食品学院,上海 201306,上海海洋大学 食品学院,上海 201306,上海海洋大学 食品学院,上海 201306,上海海洋大学 食品学院,上海 201306 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(81502955);上海市创新行动计划项目(15410722500) |
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摘 要: | 优化抗肿瘤肽QX3-1融合蛋白在大肠埃希菌中的表达条件,提高表达量。从培养基、诱导温度、诱导剂浓度和诱导时间4个单因素实验入手,优化QX3-1融合蛋白的表达条件,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)和Band Scan凝胶分析软件分析QX3-1融合蛋白的表达量。p ED-QX 3-1/BL21重组菌在LB、大豆肉汤、TB和酪蛋白胨(自制) 4种培养基中,于酪蛋白胨培养基中的表达量最高;在20、25和37℃三种诱导温度下,于37℃环境中表达量最高;在1、5、10、15和20 mmol/L乳糖浓度的诱导下,于10 mmol/L乳糖诱导最佳;在30 h的诱导时间内,于第24小时,融合蛋白的表达量最高。从培养基、诱导温度、诱导剂浓度和诱导时间4个变量中筛选出适合QX3-1融合蛋白表达的最佳组合,使融合蛋白的表达量达到了31. 2%,相比未优化前提高了近一倍。
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关 键 词: | 大肠埃希菌;融合蛋白;聚丙烯酰胺凝胶电泳;表达优化 |
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