| 猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达研究 |
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| 引用本文： | 邱德新,陈焕春,万绍贵.猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因的克隆与原核表达研究[J].中国病毒学,2003,18(2):146-151. |
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| 作者姓名： | 邱德新 陈焕春 万绍贵 |
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| 作者单位： | 华中农业大学畜牧兽医学院,湖北武汉,430070 |
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| 基金项目： | 湖北省"十五"科技攻关资助项目(2001AA202A04) |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR方法自猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组分离出核衣壳蛋白基因(orf 7),克隆到pMD18-T载体构建成重组质粒pMD18N并进行测序比较,结果表明,所克隆的核衣壳蛋白基因序列与PRRSV美洲型ATCC VR-2332株的同源性为100%,表明orf 7 是PRRSV基因组内很保守的序列;将orf 7亚克隆到原核表达载体pGEX-KG,构建成重组质粒pGEX-KGN,用pGEX-KGN转化表达菌株BL21,经SDS-PAGE和 Western-blot分析表明克隆在谷胱苷肽转移酶(Glutathione S-transferase(GST)下游的核衣壳蛋白基因与GST获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-N分子量约为41kDa,并且有免疫学反应活性;这为猪繁殖与呼吸综合征的血清学诊断方法的建立打下了基础.
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 核衣壳蛋白基因 (orf 7) 克隆与原核表达 |
| 文章编号： | 1003-5125(2003)02-0146-06 |
| 修稿时间： | 2002年8月16日 |
Cloning and Expression in E.coli of Nucleocapsid Protein Gene of Porcine reproductive and respiratory syndrome virus |
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