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| 人类RELM-beta基因启动子的结构与功能分析 | |
| 引用本文： | 郑丽端,童强松,杨渝珍,侯晓华,杨秀萍,董继华. 人类RELM-beta基因启动子的结构与功能分析[J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2007, 23(7): 548-553 |
| 作者姓名： | 郑丽端 童强松 杨渝珍 侯晓华 杨秀萍 董继华 |
| 作者单位： | 1. 华中科技大学同济医学院附属协和医院,病理科,武汉,430022 2. 华中科技大学同济医学院附属协和医院,外科,武汉,430022 3. 华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学教研室,武汉,430030 4. 华中科技大学同济医学院附属协和医院,消化内科,武汉,430022 5. 华中科技大学同济医学院附属协和医院,中心实验室,武汉,430022 |
| 摘 要： | 为克隆人类抵抗素样分子β（resistin-like molecule beta, RELMβ）基因的上游启动子序列，并观察其不同截短片段的启动子活性，以人类基因组DNA为模板，通过PCR扩增方法获得-871～+50 bp、-729～+50 bp、-471～+50 bp、-438～+50 bp、-371～+50 bp大小的RELMβ启动子片段，将其定向克隆入pGL3-Basic载体，构建荧光素酶报告基因载体，并制备转录因子CDX-2结合位点的突变或缺失体.在阳离子脂质体的介导下，报告基因载体分别瞬时转染人胚肾293细胞、结肠癌HCT116和SW480细胞、宫颈癌HeLa细胞.结果发现，各RELMβ启动子片段在293、HCT116、SW480细胞中均有活性，但在HeLa细胞中活性缺失；-471～-438 bp区存在RELMβ启动子的核心调控元件.针对该区域CDX-2转录因子结合位点进行突变，能导致RELMβ启动子活性显著降低；凝胶电泳迁移率实验表明，该区段能结合CDX-2.结果提示，成功克隆了具有活性的RELMβ启动子序列，CDX-2为其重要的转录因子，为研究RELMβ基因的转录调控机制奠定了实验基础. |
| 关 键 词： | 抵抗素样分子家族(RELMβ)基因 启动子 报告基因 |
| 收稿时间： | 2006-12-29 |
| 修稿时间： | 2006-12-29 |
Structural and Functional Analysis of Human Resistin-Like beta Promoter |
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| ZHENG Li-Duan,TONG Qiang-Song,YANG Yu-Zhen,HOU Xiao-Hua,YANG Xiu-Ping,DONG Ji-Hua. Structural and Functional Analysis of Human Resistin-Like beta Promoter[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2007, 23(7): 548-553 | |
| Authors: | ZHENG Li-Duan TONG Qiang-Song YANG Yu-Zhen HOU Xiao-Hua YANG Xiu-Ping DONG Ji-Hua |
| Affiliation: | (Department of Pathology, Department of Surgery, Department of Gastroenterology, Central Laboratory, Union Hospital affiliated to Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022; Departmentof Biochemistry and Molecular Biology, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030) |
| Abstract: | |
| Keywords: | resistin-like molecule beta gene promoter reporter gene |
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