| IL35慢病毒质粒的提取 |
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| 引用本文： | 李婷,刘潺潺.IL35慢病毒质粒的提取[J].生物技术,2019(1):35-38. |
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| 作者姓名： | 李婷 刘潺潺 |
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| 作者单位： | 中国科学院大学深圳医院(光明) |
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| 基金项目： | 深圳市博士创新项目(SZBC2017018) |
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| 摘 要： | 目的]构建可以大规模提取IL35的新型质粒p LVX-IRES-Zs Green1-mus-IL35。方法]质粒p LVX-IRES-Zs Green1和p UC57-mus-IL35-拼接用XhoⅠ和NotⅠ进行双酶切,将回收纯化的目的片段mus-IL35-拼接(NotⅠ/XhoⅠ)与回收纯化的载体p LVX-IRES-Zs Green1(NotⅠ/XhoⅠ)连接,连接产物命名为p LVX-IRES-Zs Green1-mus-IL35-拼接。连接产物转化DH5α感受态细胞,涂布LB Amp平板,37℃温箱培养过夜。结果]检测慢病毒p LVX-IL35滴度为:6×10~7TU/ml,提取质粒浓度为1～2 mg/ml。鉴定引物为测序的通用引物,上游引物和下游引物离MCS区域加上目的序列,目的PCR条带大约1 600 bp,送鉴定正确菌液测序。测序结果比对正确。结论]采用新型超量无内毒素质粒提试剂盒,可以大规模方便快速提取相关质粒。
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| 关 键 词： | pLVX-IRES-ZsGreen1-mus-IL35 慢病毒 PCR 质粒 |
Production of IL35 lentiviral plasmid |
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| LI Ting,LIU Chan-chan.Production of IL35 lentiviral plasmid[J].Biotechnology,2019(1):35-38. |
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| Authors: | LI Ting LIU Chan-chan |
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| Institution: | (Shenzhen Hospital(Guangming),University of Chinese Academy of Sciences,Shenzhen 518000,China) |
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| Abstract: | LI Ting;LIU Chan-chan(Shenzhen Hospital(Guangming),University of Chinese Academy of Sciences,Shenzhen 518000,China) |
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| Keywords: | pLVX-IRES-ZsGreen1-mus-IL35 lentivirus PCR plasmid |
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