| 重组MBP-SUV39H1在大肠杆菌中表达与纯化 |
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| 引用本文： | 李剑,李丕龙. 重组MBP-SUV39H1在大肠杆菌中表达与纯化[J]. 生物技术, 2019, 0(1): 11-15,22 |
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| 作者姓名： | 李剑 李丕龙 |
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| 作者单位： | 清华大学生命科学学院 |
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| 摘 要： | [目的]在大肠杆菌中获得具有甲基转移酶活性的重组MBP-SUV39H1蛋白。[方法]通过在大肠杆菌中同时表达异染色质蛋白1(HP1)与重组MBP-SUV39H1蛋白的方法,实现了MBP-SUV39H1的表达,采用his亲和纯化与分子筛Superdex200(SD200)两步分离纯化方案,并利用质谱和ELISA检测MBP-SUV39H1的甲基转移酶活性。[结果]利用大肠杆菌成功表达了MBP-SUV39H1融合蛋白,经纯化后目的条带单一,并具有良好的甲基转移酶活性。[结论]纯化的具有甲基转移酶活性的MBP-SUV39H1可用于抑制剂筛选等后续研究。
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| 关 键 词： | SUV39H1 HP1 原核共同表达 蛋白质纯化 活性测定 |
Expression and purification of MBP-SUV39H1 protein in E. coli |
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| Affiliation: | (School of Life Sciences,Tsinghua University,Beijing 100084,China) |
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| Abstract: | LI Jian;LI Pei-long(School of Life Sciences,Tsinghua University,Beijing 100084,China) |
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| Keywords: | SUV39H1 HP1 prokaryotic coexpression protein purification activity assay |
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