| 干扰PKM2对人白血病细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制 |
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| 引用本文： | 汪路,杨丽媛,唐雨婷,陶瑶,雷力,敬一佩,蒋雪坷,张伶.干扰PKM2对人白血病细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制[J].中国生物工程杂志,2019,39(3):13-20. |
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| 作者姓名： | 汪路 杨丽媛 唐雨婷 陶瑶 雷力 敬一佩 蒋雪坷 张伶 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学检验医学院 临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆市重点实验室 重庆 400016 |
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| 基金项目： | * 国家自然科学基金面上项目(81873973);重庆市渝中区科技计划(20170411);重庆市研究生科研创新资助项目(CYS17155) |
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| 摘 要： | 目的:探讨糖酵解酶丙酮酸激酶M2型(PKM2)对人白血病细胞体外增殖和凋亡的影响及潜在机制。方法:将靶向PKM2的慢病毒载体转染人K562细胞株(sh PKM2组),同时设立空载体转染组为对照(Vector组)。采用qRT-PCR和Western blot技术分别检测Vector组和sh PKM2组PKM2 mRNA和蛋白的表达以及自噬标志物的变化; CCK-8实验检测细胞体外增殖能力;流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况; Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果:在稳定干扰PKM2后,PKM2的mRNA(t=11. 58,P=0. 000 3)和蛋白水平(t=11. 88,P=0. 000 3)均明显降低。与Vector组比较,shPKM2组细胞体外增殖能力显著降低(F=118. 87,P 0. 000 1)。同时,干扰PKM2可使K562细胞周期阻滞在G1期,细胞凋亡率显著增加(t=37. 23,P 0. 000 1);使促凋亡蛋白Bax表达增加(t=15. 36,P=0. 000 1)、抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(t=9. 965,P=0. 000 6)。此外,干扰PKM2可减弱K562细胞自噬水平,表现为LC3Ⅱ降低(t_(LC3Ⅱ)=10. 32,P_(LC3Ⅱ)=0. 000 5),而p62水平增加(t_(p62)=14. 59,P_(p62)=0. 000 1)。还发现自噬诱导剂能逆转shPKM2引起的白血病细胞体外增殖能力减弱(F=96. 32,P 0. 000 1)。结论:以上结果表明干扰PKM2可抑制人白血病K562细胞的体外增殖并促进其凋亡,其机制可能与PKM2介导的自噬活性降低有关,提示PKM2可能作为白血病诊疗的一个潜在靶点。
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| 关 键 词： | PKM2 白血病 增殖 凋亡 自噬 |
| 收稿时间： | 2018-10-21 |
Effects of PKM2 Knockdown on Proliferation and Apoptosis of Human Leukemia Cells and Its Potential Mechanism |
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| Lu WANG,Li-yuan YANG,Yu-ting TANG,Yao TAO,Li LEI,Yi-pei JING,Xue-ke JIANG,Ling ZHANG.Effects of PKM2 Knockdown on Proliferation and Apoptosis of Human Leukemia Cells and Its Potential Mechanism[J].China Biotechnology,2019,39(3):13-20. |
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| Authors: | Lu WANG Li-yuan YANG Yu-ting TANG Yao TAO Li LEI Yi-pei JING Xue-ke JIANG Ling ZHANG |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PKM2 Leukemia Proliferation Apoptosis Autophagy |
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