| AlphaLISA检测金黄色葡萄球菌肠毒素E方法的建立 |
| |
| 引用本文： | 张力文,赵俊清,郑玉玲,律清宇,姜永强.AlphaLISA检测金黄色葡萄球菌肠毒素E方法的建立[J].生物技术通讯,2019(3):338-342. |
| |
| 作者姓名： | 张力文 赵俊清 郑玉玲 律清宇 姜永强 |
| |
| 作者单位： | 安徽医科大学;军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所 |
| |
| 基金项目： | 国家科技重大专项(2018ZX10711001-003) |
| |
| 摘 要： | 目的:利用AlphaLISA技术,建立新型均相检测方法,对金黄色葡萄球菌肠毒素E(SEE)进行检测。方法:采用2种SEE抗体建立AlphaLISA检测方法,羊抗肠毒多克隆抗体同受体微球偶联,SEE小鼠单克隆抗体标记生物素,并同偶联了亲和素的供体微球连接,3种组分与待测抗原形成双抗体夹心结构,680nm的光激发供体微球产生能量,将周围反应体系中的氧分子转变为激发态,并将能量传递给受体微球,产生520~620nm的荧光,荧光信号与抗原浓度正相关。对该方法的反应体系进行优化,验证其重复性、敏感性和特异性,并采用该方法检测菌液上清和食品模拟样本。结果:所建立的AlphaLISA检测方法重复性较好,批间变异系数和批内变异系数皆小于10%;检测SEE的灵敏度可以达到100pg/mL,并与其他几种毒素均无交叉反应,具有较好的特异性。该方法也能够准确地对金黄色葡萄球菌菌液上清中的SEE进行检测,对食品模拟样本的检测也有较好的灵敏度。结论:建立了检测SEE的AlphaLISA方法。该方法均相免洗,操作便捷,用时短,灵敏度更高,可对菌液上清和不同食品模拟样本中的SEE进行检测。
|
| 关 键 词： | AlphaLISA 金黄色葡萄球菌肠毒素E 荧光微球 |
Establishment of AlphaLISA Method for Detection of Staphylococcus aureus Enterotoxin E |
| |
| ZHANG Li-Wen,ZHAO Jun-Qing,ZHENG Yu-Ling,LYU Qing-Yu,JIANG Yong-Qiang.Establishment of AlphaLISA Method for Detection of Staphylococcus aureus Enterotoxin E[J].Letters in Biotechnology,2019(3):338-342. |
| |
| Authors: | ZHANG Li-Wen ZHAO Jun-Qing ZHENG Yu-Ling LYU Qing-Yu JIANG Yong-Qiang |
| |
| Institution: | (Anhui Medical University, Hefei 230032;State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Academy of Mili?tary Medical Sciences, Beijing 100071,China) |
| |
| Abstract: | ZHANG Li-Wen;ZHAO Jun-Qing;ZHENG Yu-Ling;LYU Qing-Yu;JIANG Yong-Qiang(Anhui Medical University, Hefei 230032;State Key Laboratory of Pathogen and Biosecurity, Academy of Mili?tary Medical Sciences, Beijing 100071,China) |
| |
| Keywords: | amplified luminescent proximity homogeneous assay linked immunosorbent assay(AlphaLISA) Staphylococcus aureus enterotoxin E fluorescent microspheres |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
|
