| 应用流式细胞Index Sorting技术研究小鼠胚胎生血内皮细胞 |
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| 引用本文： | 倪艳丽,李昀桥,兰雨,刘兵.应用流式细胞Index Sorting技术研究小鼠胚胎生血内皮细胞[J].生物技术通讯,2019(2):242-247. |
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| 作者姓名： | 倪艳丽 李昀桥 兰雨 刘兵 |
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| 作者单位： | 军事科学院军事医学研究院;解放军总医院第五医学中心;暨南大学基础医学院 |
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| 基金项目： | 北京市科技计划(Z171100000417009) |
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| 摘 要： | 目的:应用流式Index Sorting技术鉴定小鼠胚胎期d10(E10)的主动脉中生血内皮细胞(HEC)的表面分子表达特征,并结合体外孵育实验及免疫组化染色验证HEC的生血潜能。方法:已有研究显示细胞表面分子Kit和CD47均能标记造血相关群体。在此基础上,应用流式细胞Index Sorting技术分选单个分子表型为CD41^-CD43^-CD45^-CD31^+Kit^+的主动脉内皮细胞,并与基质细胞OP9-DL1共孵育诱导培养7 d,进而结合单个内皮细胞的流式分选特征参数,及诱导后生成CD45^+造血细胞和CD31^+内皮细胞的效率,综合回溯分析Kit和CD47富集HEC的效果。结果:具有生血潜能的HEC均富集在CD47^+内皮细胞群体中,CD47分子将HEC群体的精度提高1.5倍;CD47^+内皮群体中,仍有60%以上的内皮不具备生血能力,提示进一步探索寻找富集HEC表面标志的必要性。结论:应用流式细胞Index Sorting技术发现CD47分子能显著富集小鼠胚胎期HEC,为进一步精准富集并研究HEC提供了重要的技术手段。
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| 关 键 词： | IndexSorting技术 生血内皮细胞 细胞表面分子CD47 体外造血孵育 |
Using Flow Cytometric Index Sorting Technique to Identify Hemogenic Endothelial Cells in Mouse Embryonic Aorta Region |
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| NI Yan-Li,LI Yun-Qiao,LAN Yu,LIU Bing.Using Flow Cytometric Index Sorting Technique to Identify Hemogenic Endothelial Cells in Mouse Embryonic Aorta Region[J].Letters in Biotechnology,2019(2):242-247. |
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| Authors: | NI Yan-Li LI Yun-Qiao LAN Yu LIU Bing |
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| Institution: | (Academy of Military Medical Sciences,Academy of Military Sciences,Beijing 100850,China;Fifth Medical Center,General Hospital of PLA,Beijing 100071,China;School of Medicine,Jinan University,Guangzhou 510632,China) |
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| Abstract: | NI Yan-Li;LI Yun-Qiao;LAN Yu;LIU Bing(Academy of Military Medical Sciences,Academy of Military Sciences,Beijing 100850,China;Fifth Medical Center,General Hospital of PLA,Beijing 100071,China;School of Medicine,Jinan University,Guangzhou 510632,China) |
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| Keywords: | Index Sorting technology hemogenic endothelial cell(HEC) cell surface molecule CD47 in vitro co-culture assay |
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