| 孕烷X受体配体结合结构域蛋白晶体的X线衍射结构解析 |
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| 引用本文： | 冯帆,姜棋予,孙慧伟,王祥喜,申立军,辛绍杰,李伯安.孕烷X受体配体结合结构域蛋白晶体的X线衍射结构解析[J].生物技术通讯,2019(3):365-370. |
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| 作者姓名： | 冯帆 姜棋予 孙慧伟 王祥喜 申立军 辛绍杰 李伯安 |
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| 作者单位： | 解放军总医院第五医学中心临床检验医学中心;解放军总医院第五医学中心临床研究管理中心;中国科学院生物物理研究所;解放军总医院第五医学中心肝脏衰竭诊疗中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81702986) |
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| 摘 要： | 目的:利用X线衍射技术解析孕烷X受体(PXR)配体结合结构域(LBD)蛋白晶体的3维结构。方法:对PXR蛋白LBD(130~434氨基酸残基)序列进行密码子优化并化学合成后克隆至pRSFDuet-1表达载体,再将载体导入大肠杆菌BL21(DE3),对PXR-LBD蛋白进行原核表达与分离纯化;采用晶体筛选试剂盒筛选蛋白结晶条件,采用悬滴法获得目标蛋白的晶体;对获得的蛋白晶体进行X线晶体衍射检测,并收集相关数据建立PXR-LBD的三维结构。结果:获得了PXR-LBD的高质量晶体并利用X线衍射解析了该蛋白质晶体的结构数据,使用Phenix.refine软件和COOT软件等对结构进行修正,最终获得了高分辨率的3维结构数据。结论:完成了孕烷X受体配体结合结构域蛋白晶体的X线衍射结构解析,为研究和开发PXR相关药物奠定了基础。
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| 关 键 词： | 孕烷X受体 X线衍射 蛋白质晶体 三维维结构解析 |
Three Dimension Structure Analysis of Pregnane X Receptor Ligand Binding Domain via Protein Crystals X-Ray Diffraction |
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| FENG Fan,JIANG Qi-Yu,SUN Hui-Wei,WANG Xiang-Xi,SHEN Li-Jun,XIN Shao-Jie,LI Bo-An.Three Dimension Structure Analysis of Pregnane X Receptor Ligand Binding Domain via Protein Crystals X-Ray Diffraction[J].Letters in Biotechnology,2019(3):365-370. |
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| Authors: | FENG Fan JIANG Qi-Yu SUN Hui-Wei WANG Xiang-Xi SHEN Li-Jun XIN Shao-Jie LI Bo-An |
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| Institution: | (Center for Clinical Laboratory,Fifth Medical Center, General Hospital of Chinese PLA, Beijing 100039;Research Center for Clinical and Translational Medicine,Fifth Medical Center, General Hospital of Chinese PLA, Beijing 100039;Liver FailureTreatment and Research Center, Fifth Medical Center, General Hospital of Chinese PLA, Beijing 100039;National Laboratory of Macromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101,China) |
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| Abstract: | FENG Fan;JIANG Qi-Yu;SUN Hui-Wei;WANG Xiang-Xi;SHEN Li-Jun;XIN Shao-Jie;LI Bo-An(Center for Clinical Laboratory,Fifth Medical Center, General Hospital of Chinese PLA, Beijing 100039;Research Center for Clinical and Translational Medicine,Fifth Medical Center, General Hospital of Chinese PLA, Beijing 100039;Liver FailureTreatment and Research Center, Fifth Medical Center, General Hospital of Chinese PLA, Beijing 100039;National Laboratory of Macromolecules, Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101,China) |
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| Keywords: | pregnane X receptor X-ray diffraction protein crystals 3-dimensional structure analysis |
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