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趋化因子受体CX3CR1调控人主动脉瓣膜间质细胞成骨分化的作用研究
引用本文:朱颖,范梦恬,李具琼,陈彬,张盟浩,吴静红,施琼. 趋化因子受体CX3CR1调控人主动脉瓣膜间质细胞成骨分化的作用研究[J]. 中国生物工程杂志, 2019, 39(8): 7-16. DOI: 10.13523/j.cb.20190802
作者姓名:朱颖  范梦恬  李具琼  陈彬  张盟浩  吴静红  施琼
作者单位:重庆医科大学检验医学院临床诊断教育部重点实验室 重庆 400016
基金项目:*国家自然科学基金(81672103)
摘    要:目的:探究趋化因子受体CX3CR1调控人主动脉瓣膜间质细胞成骨分化的作用和机制,为钙化性主动脉瓣膜疾病的早期干预和治疗提供新思路。方法:取非钙化主动脉瓣(3例)和钙化主动脉瓣(5例),免疫组织化学染色检测成骨相关转录因子Runx2、骨桥蛋白OPN和骨钙蛋白OCN的表达;取3例非钙化的主动脉瓣,采用胶原酶连续消化法分离人主动脉瓣膜间质细胞,观察细胞形态及生长状态,并采用细胞免疫荧光进行表型鉴定。对成骨诱导培养的人主动脉瓣膜间质细胞分别过表达和干扰趋化因子受体CX3CR1,平行设置CM组、OM组和negative control+OM组,采用qPCR和Western blot检测Runx2、OPN和OCN的表达,Western blot检测AKT和p-AKT的表达。茜素红S染色评价晚期钙结节形成情况。结果:临床标本显示钙化的主动脉瓣较非钙化的主动脉瓣高表达CX3CR1(P 0. 05);成功分离人主动脉瓣膜间质细胞,α-SMA和Vimentin阳性,vWF阴性。与CM、OM、negative control组比较,CX3CR1+OM组Runx2、OPN和p-AKT表达上调(P 0. 05),且茜素红S染色可见明显钙结节;与CM、OM、negative siRNA control+OM组比较,si CX3CR1+OM组Runx2、OPN和p-AKT表达下调(P 0. 05),且茜素红S染色可见钙结节减少。结论:趋化因子受体CX3CR1可能通过AKT信号通路促进人主动脉瓣膜间质细胞成骨分化。

关 键 词:钙化性主动脉瓣膜疾病  人主动脉瓣膜间质细胞  趋化因子受体CX3CR1  成骨分化  
收稿时间:2019-01-27

Effect of Chemokine Receptor CX3CR1 on Osteogenic Differentiation of Human Aortic Valve Interstitial Cells
ZHU Ying,FAN Meng-tian,LI Ju-qiong,CHEN Bin,ZHANG Meng-hao,WU Jing-hong,SHI Qiong. Effect of Chemokine Receptor CX3CR1 on Osteogenic Differentiation of Human Aortic Valve Interstitial Cells[J]. China Biotechnology, 2019, 39(8): 7-16. DOI: 10.13523/j.cb.20190802
Authors:ZHU Ying  FAN Meng-tian  LI Ju-qiong  CHEN Bin  ZHANG Meng-hao  WU Jing-hong  SHI Qiong
Abstract:
Keywords:Calcific aortic valve disease  Human aortic valve interstitial cells  Chemokine receptor CX3CR1  Osteogenic differentiation  
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