吡哆醛激酶基因在家蚕体内的时空表达特征

【目的】了解家蚕Bombyx mori维生素B₆关键代谢酶吡哆醛激酶（pyridoxal kinase, PLK）在家蚕不同组织间的表达差异。【方法】原核表达家蚕重组PLK， 获得目的蛋白制备多克隆抗体， 利用Western blot方法对PLK在家蚕不同发育时期、 5龄第3天幼虫不同组织及5龄不同日龄幼虫表皮、 头部和马氏管中的表达进行分析； 并采用实时荧光定量PCR的方法对PLK基因在家蚕不同组织中的mRNA转录水平进行比较。【结果】PLK在家蚕5龄幼虫的表达水平最高， 在5龄第3天幼虫各组织中的表达由高到低依次为： 精巢、 马氏管、 表皮、 中肠、 头部、 卵巢、 脂肪体、 丝腺； 5龄期不同日龄幼虫表皮组织的表达差异最大， 头部和马氏管中均为前期表达量稍高于后期。在转录水平方面， 精巢的表达量最高， 其次是马氏管和头部。【结论】PLK在家蚕不同发育时期及组织中的差异表达进一步证实PLK在家蚕VB6代谢中的生物学功能的重要性。

Characterization of temporal and spatial expression of pyridoxal kinase gene in Bombyx mori

Aim] To identify the differential expression of pyridoxal kinase(PLK),which is a key enzyme related to VB6 metabolism,in different tissues of Bombyx mori.Methods] The recombinant plasmid was transformed to Escherichia coli Rosetta for induction,expression and purification,and then the polyclonal antibody was prepared.The expression of PLK at different developmental stages,in different tissues of day-3 5th instar larva and in the tissues of cuticle,head and Malpighian tubules on different days of the 5th i...