骨髓间充质干细胞亲和肽MMP底物肽复合物的构建及其作为小分子药物载体的初步研究

为了探讨骨髓间充质干细胞亲和肽与基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinase，MMP）底物肽复合后作为小分子药物载体的可行性，采用噬茵体肽库技术，用分离培养的大鼠骨髓间充质干细胞（mousemesenchymalstemcells，MSCs）筛选噬菌体环七肽库，获得MSCs高亲和性多肽．合成FrrC（Frrc—CSTNPKVLC，FITC．P1）和生物素（Biotin—CSTNPKVLC，Bio-PI）标记的亲和肽，流式细胞术和ELISA方法检测其与MSCs的亲和性；将DAPI标记的MSC-Bio-P1复合物植入裸鼠肿瘤组织周围，检测复合物在体内的稳定性．将亲和肽与基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases，MMPs）特异性底物肽（GPLGIAGQ）连接，合成FITC标记的亲和肽．底物肽复合物（FITC-Ahx-CSTNPKVLCGPLGIAGQ，FITC—P1-P2），通过流式细胞术检测其对MSCs的亲和性，毛细管电泳方法检测MMP对FITC-P1-P2的酶切效果．结果表明，通过噬菌体肽库筛选获得的MSCs亲和肽，在体内外对MSCs均具有良好的亲和性和稳定性；亲和肽与底物肽的复合物（FTTC—P1-P2）对MSCs仍有较好的亲和性，并且能够被MMPs酶切．以上研究表明，MSCs亲和肽．MMP底物肽复合物（CSTNPKVLCGPLGIAGQ，P1-P2）可以作为MSCs与小分子药物相连的连接子，从而对MSCs作为小分子药物（如化学药物）载体的可行性提供了实验依据．