苏云金芽胞杆菌鲇泽亚种HD-133cry1D的表达调控

利用PCR扩增基因cry1D启动子及上游区片段，在测序的基础上构建含cry1DlacZ融合基因穿梭质粒，导入不同遗传背景的苏云金芽胞杆菌菌株中，并以cry1AblacZ融合基因为对照测定β半乳糖苷酶活性，检测启动子上游区的作用。结果表明，cry1DlacZ和cry1AblacZ融合基因在不同遗传背景的菌株中表达完全不同，也许一些宿主专一性的因子参与了转录调控；而在同一菌株中Ccry1DlacZ和cry1AblacZ的表达差异是由于上游区的不同以及竞争有限的σ因子所致。利用PCR定点诱变技术突变其SD序列GGGGA为GGAGG后，cry1DlacZ融合基因的表达提高了1.0～1.6倍。表明GGAGG是苏云金芽胞杆菌合适的SD序列，也揭示了不合适的SD序列是cry1D表达量低的原因之一。