抗人β-BCG单克隆抗体的制备及化学发光检测方法的建立

目的：制备人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）单克隆抗体，建立人β-HCG双抗体夹心CLIA检测方法。方法：用人β-HCG抗原免疫小鼠，通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株，然后将细胞株扩大培养并纯化上清液获得抗体，测定抗体亲和力、特异性及表位，最后建立双抗体夹心CLIA方法。结果：获得4株抗人β-HCG的杂交瘤细胞株（β-1—1、β-2—1、β-3—1、β-4—1）。用β-1—1和β-2—1建立的双抗体夹心法的检测范围为0．5mlU／mL．800mlU／mL，灵敏度0．23mIU／mL，检测结果的相对偏差均在±10％内，回收率在90％以上。结论：本研究最终成功制备了抗人β-HCGmAb，建立了定量检测人β-HCG的双抗体夹心CLIA方法，为β-HCG检测及疾病的诊断奠定基础。