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| 鸭瘟病毒gB蛋白N端主要抗原域的表达及间接ELISA检测 | |
| 引用本文： | 潘华奇,曹瑞兵,刘磊,孙海亮,姬向波,陈勇军,陈溥言. 鸭瘟病毒gB蛋白N端主要抗原域的表达及间接ELISA检测[J]. 微生物学报, 2008, 48(1) |
| 作者姓名： | 潘华奇 曹瑞兵 刘磊 孙海亮 姬向波 陈勇军 陈溥言 |
| 作者单位： | 1. 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095;甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070 2. 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095 3. 甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070 |
| 摘 要： | 在分析鸭瘟病毒gB蛋白抗原性的基础上,设计一对引物克隆gB蛋白N端抗原性较好的抗原域编码基因.将克隆的基因定向插入pET-32a的EcoR Ⅰ和HindⅢ之间,构建了gB蛋白主要抗原域原核表达载体pET-gB1.将pET-gB1质粒转化BL(21)宿主菌后,对培养和表达条件进行了优化,实现了DPV gB蛋白主要抗原域的高效表达.免疫印迹试验表明获得的表达产物具有良好的反应原性.应用His·Bind亲和层析柱纯化重组DPV gB蛋白,以纯化的重组gB1蛋白作为检测抗原,初步建立了检测鸭瘟病毒抗体的igB1-ELISA.结果表明,抗原的最佳包被浓度为6.5μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶80,阳性标准初步定为:待检血清OD490＞0.4,且待检血清OD490/阴性血清OD490＞2.应用igB1-ELISA对鸭血清样品进行检测,结果表明igB1-ELISA与全病毒包被的iDPV-ELISA符合率达到95.6%. |
| 关 键 词： | 鸭瘟病毒 gB蛋白 原核表达 抗原域 间接ELISA |
Prokaryotic expression of N-terminal antigenic domain of duck plague virus gB protein and the establishment of putative indirect ELISA assay |
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| Huaqi Pan,Ruibing Cao,Lei Liu,Hailiang Sun,Xiangbo Ji,Yongjun Chen,Puyan Chen. Prokaryotic expression of N-terminal antigenic domain of duck plague virus gB protein and the establishment of putative indirect ELISA assay[J]. Acta microbiologica Sinica, 2008, 48(1) | |
| Authors: | Huaqi Pan Ruibing Cao Lei Liu Hailiang Sun Xiangbo Ji Yongjun Chen Puyan Chen |
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