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人SUMO3基因突变体(SUMO3-K11R)真核表达质粒的构建及其鉴定
引用本文:伍权,李文庭.人SUMO3基因突变体(SUMO3-K11R)真核表达质粒的构建及其鉴定[J].生物技术世界,2012(2):4-6,14.
作者姓名:伍权  李文庭
作者单位:安徽医科大学附属省立医院中心实验室
基金项目:国家自然科学基金(81001046)
摘    要:构建人SUMO3基因K11R突变体的真核表达质粒并对其进行功能鉴定。方法:PCR扩增人SUMO3基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1内,构建含人SUMO基因K11R突变体的真核表达质粒pEGFP-SUMO3-K11R。使用真核转染,Western blot和免疫荧光实验的方法,鉴定SUMO-K11R在真核细胞中的表达和功能。结果:克隆的人SUMO-K11R基因,测序结果显示完全正确。瞬时转染真核细胞后,Western blot在预期的位置检测出目的条带,免疫荧光实验显示SUMO3-K11R突变体蛋白其功能与SUMO1蛋白相似,可作为研究SUMO1蛋白和SUMO3蛋白功能差异的有力工具。结论:成功构建了含人SUMO-K11R基因的真核表达质粒。

关 键 词:SUMO3-K11R基因  质粒  真核表达  免疫荧光

Construction and characterization of human SUMO3 mutant (SUMO3-K11R) eukaryotic expression vector
Authors:WU Quan  LI Wenting
Institution:(Department of Central Lab,Anhui Provincial Hospital,Anhui Medical University,Hefei 230001)
Abstract:
Keywords:
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