| 弱化呼吸链水平对代谢工程大肠杆菌聚羟基丁酸乳酸酯合成的影响 |
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| 引用本文： | 陆静娴,李志敏,叶勤,吴辉.弱化呼吸链水平对代谢工程大肠杆菌聚羟基丁酸乳酸酯合成的影响[J].生物工程学报,2019,35(1):59-69. |
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| 作者姓名： | 陆静娴 李志敏 叶勤 吴辉 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (No. 21776083)，国家重点研发计划 (No. 2017YFB0309302)，工业生物催化教育部重点实验室开放课题 (No. 2015101) 资助。 |
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| 摘 要： | 聚3-羟基丁酸乳酸酯Poly(3-hydroxybutyrate-co-lactate), P(3HB-co-LA)],属于聚羟基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates,PHA)家族的一员,是一种具有良好生物相容性和可降解性的天然高分子生物材料。文中通过在大肠杆菌中引入来源于富养罗尔斯通氏菌Ralstonia eutropha的β-酮硫解酶、乙酰乙酰Co A还原酶、来源于丙酸梭菌Clostridium propionicum的丙酰Co A转移酶突变体以及荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens strain 2P24来源的PHA合成酶突变体等异源酶,成功实现了一步法利用葡萄糖合成P(3HB-co-LA),其中乳酸组分的摩尔百分比达到1.6%,聚合物含量为83.9wt%。在此基础上,通过敲除辅酶Q8合成所需的黄素异戊烯基转移酶基因(ubi X)来弱化呼吸链水平,从而增强乳酸积累,并进一步缺失乳酸脱氢酶基因(dld)以减少乳酸在发酵后期转化成丙酮酸,最终将P(3HB-co-LA)中乳酸组分的摩尔百分比提高至14.1%,而聚合物含量为81.7wt%。上述实验结果表明,采用弱化呼吸链水平策略可有效提高聚合物中乳酸组分的摩尔百分比,从而提供了一种改变生物合成聚合物中单体组分含量的新思路。
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| 关 键 词： | 聚3-羟基丁酸乳酸酯，大肠杆菌，代谢工程，乳酸组分，呼吸链弱化，Q8，聚羟基脂肪酸酯(PHA) |
| 收稿时间： | 2018/3/25 0:00:00 |
Effect of reducing the activity of respiratory chain on biosynthesis of poly(3-hydroxybutyrate-co-lactate) in Escherichia coli |
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| Jingxian Lu,Zhimin Li,Qin Ye and Hui Wu.Effect of reducing the activity of respiratory chain on biosynthesis of poly(3-hydroxybutyrate-co-lactate) in Escherichia coli[J].Chinese Journal of Biotechnology,2019,35(1):59-69. |
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| Authors: | Jingxian Lu Zhimin Li Qin Ye and Hui Wu |
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| Institution: | State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China,State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China,State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China and State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | poly(3-hydroxybutyrate-co-lactate) Escherichia coli metabolic engineering lactate fraction reduced respiration chain activity Q8 polyhydroxyalkanoates (PHA) |
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