不同方向内含子对重组CHO细胞中神经生长因子表达的影响(英文) |
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引用本文: | 董卫华,李翠萍,杨赟,王天云,王芳.不同方向内含子对重组CHO细胞中神经生长因子表达的影响(英文)[J].生物工程学报,2019(6). |
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作者姓名: | 董卫华 李翠萍 杨赟 王天云 王芳 |
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作者单位: | 新乡医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室;河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心 |
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摘 要: | 为了研究不同方向的嵌合体内含子对重组神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)基因表达的影响,以人β-珠蛋白第一内含子5'端剪接序列和人免疫球蛋白重链可变区内含子3'端剪接序列组合而成的嵌合体内含子作为研究对象,在NGF基因5'端插入不同方向的嵌合体内含子,构建含不同方向内含子的NGF基因表达载体。转染至CHO细胞后,G418筛选稳定转染的细胞,荧光定量PCR、ELISA和Western blotting检测不同载体NGF基因的表达情况。结果显示内含子可以大幅度提高NGF基因的表达,且正向内含子对NGF基因表达的增强作用无论是在mRNA水平还是在蛋白水平都要高于反向内含子。所以内含子能够提高外源NGF基因的表达,且内含子调控转基因表达具有方向性。
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