| 柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 韩红玉, 黄兵, 赵其平,. 柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建[J]. 生物工程学报, 2001, 17(6): 669-672 |
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| 作者姓名： | 韩红玉 黄兵 赵其平 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所, |
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| 基金项目： | "九五"国家科技攻关项目基金资助(96-005-02-01-05). |
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| 摘 要： | 用建立表达性文库的方法 ,构建了Eimeriatenella孢子化卵囊噬菌体ZAP表达性cDNA文库。首先用TRIzol试剂盒从E .tenella孢子化卵囊中提取总RNA ,再用Oligo(dT)12纤维素柱从总RNA中分离mRNA ,以mRNA为模板 ,Oligo(dT)18Linker Primer为引物 ,反转录合成cDNA第一链 ,再在DNA聚合酶Ⅰ作用下置换合成第二链cDNA。cDNA第二链合成后用PfuDNA聚合酶补平XhoⅠ位点 ,再与EcoRⅠAdapters连接 ,经XhoⅠ酶切后 ,凝胶电泳回收 500bp～4.0kp之间的cDNA片段 ,纯化后的双链cDNA与载体ZAPExpressvector连接。体外包装后得到E .tenella孢子化卵囊的cDNA表达性文库 ,经测定该文库的容量为 6×106 ,扩增后文库的滴度为 1×1011 Pfu mL ,经PCR测定 ,该文库的重组率为 96%。
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| 关 键 词： | 柔嫩艾美耳球虫 孢子化卵囊 cDNA文库 |
| 文章编号： | 1000-3061(2001)06-0669-04 |
| 修稿时间： | 2001-05-14 |
Construction of cDNA Library of Eimeria tenella Sporulated Oocysts |
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| HAN Hong-Yu HUANG Bing ZHAO Qi-Ping. Construction of cDNA Library of Eimeria tenella Sporulated Oocysts[J]. Chinese journal of biotechnology, 2001, 17(6): 669-672 |
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| Authors: | HAN Hong-Yu HUANG Bing ZHAO Qi-Ping |
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| Affiliation: | Key Laboratory for Animal Parasitology of Ministry of Agricultry, Shanghai Institute of Animal Parasitology, CAAS, Shanghai 200232, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Eimeria tenella sporulated oocysts cDNA library |
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