| 大鼠脑cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 宋学文,赵崇,周仁,郭善一,张镜宇.大鼠脑cDNA文库的构建[J].生物化学与生物物理进展,1996,23(2):169-172. |
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| 作者姓名： | 宋学文 赵崇 周仁 郭善一 张镜宇 |
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| 作者单位： | 天津医科大学内分泌研究所;天津医科大学内分泌研究所;天津医科大学总医院内分泌科;天津医科大学代谢病中心;天津医科大学内分泌研究所 |
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| 基金项目： | 天津市21世纪青年科学基金资助项目. |
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| 摘 要： | 采用简单高效的cDNA合成技术制备Wistar大鼠脑cDNA基因文库，以纯化的poly( A)+－RNA为模板，含Not I切点的oligo－（dT）15为引物，在反转录酶的作用下，合成第一股单链cDNA；用E.coli RNase H除去模板RNA，并以E.coli DNA聚合酶Ｉ，E.coli DNA连接酶和T4 DNA聚合酶催化合成cDNA第二条链，即成为双链cDNA；此双股cDNA除0．5μg用于插入pSPORT I载体，转入E.coli DH5a，建成cDNA文库外，其余保存在－20℃，以此cDNA为模板，应用PCR方法，先后克隆了谷氨酸脱羧酶（GAD，1800bp）、神经元特异性烯醇化酶（NSE，1340bp），甲状腺激素受体（T3－receptor，1230bp）、胆囊收缩素（CCK，345bp）的全编码基因．
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| 关 键 词： | Wistar大鼠脑 cDNA文库 聚合酶链式反应 分子克隆 |
| 收稿时间： | 4/7/1995 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 9/7/1995 12:00:00 AM |
Construction of a Wistar Rat Brain cDNA Library |
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| Song Xuewen,Zhao Chong,Zhou Ren,Guo Shanyi and Zhang Jingyu.Construction of a Wistar Rat Brain cDNA Library[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,1996,23(2):169-172. |
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| Authors: | Song Xuewen Zhao Chong Zhou Ren Guo Shanyi and Zhang Jingyu |
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| Institution: | Institute of Endocrinology, Tianjin Medical University;Institute of Endocrinology, Tianjin Medical University;Institute of Endocrinology, Tianjin Medical University;General Hospital, Tianjin Medical University;Prevention and control Center of Metabolic Disease, Tianjin Medical University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Wistar rat brain cDNA library PCR molecular cloning |
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