甘油脱水酶β亚基融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 |
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引用本文: | 陈永胜,刘长江,李长彪,翟景波.甘油脱水酶β亚基融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化[J].工业微生物,2005,35(2):19-23. |
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作者姓名: | 陈永胜 刘长江 李长彪 翟景波 |
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作者单位: | 内蒙古民族大学农学院,内蒙古,通辽,028042;沈阳农业大学食品学院,辽宁,沈阳,110161;宝生物工程大连有限公司,辽宁,大连,116600 |
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基金项目: | 辽宁省重大课题(99205002) |
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摘 要: | 为了表达及纯化甘油脱水酶β亚基蛋白,采用PCR及DNA重组技术将甘油脱水酶β亚基基因gldB重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达。结果表明,转化重组质粒pMAL/gldB的大肠杆菌经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示:表达出的MBP-glddB融合蛋白相对分子质量约72000,与预期大小一致,并经Western blot分析证实。进一步通过直链淀粉树脂亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白。已获得的重组甘油脱水酶β亚基蛋白有利于研究其生物学性能。
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关 键 词: | 甘油脱水酶 gldB基因 原核表达 融合蛋白 |
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