| 斑马鱼gpr98基因敲除试验模型的构建 |
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| 引用本文： | 邓明,曾宇茜,刘乐,郭纪锋,邓云,唐北沙. 斑马鱼gpr98基因敲除试验模型的构建[J]. 激光生物学报, 2019, 28(3): 258-263,269 |
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| 作者姓名： | 邓明 曾宇茜 刘乐 郭纪锋 邓云 唐北沙 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅医院神经内科,湖南长沙,410006;湖南师范大学生命科学学院,湖南长沙,410081 |
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| 摘 要： | gpr98基因突变与多种疾病相关,该基因在人类和斑马鱼中高度保守。建立斑马鱼gpr98基因突变体稳定系,可为阐释gpr98基因功能提供良好的动物模型和研究基础。本文利用CRISPR/Cas9基因敲除技术在斑马鱼gpr98基因2号外显子上选取两个相距42bp的靶位点,分别体外合成sgRNA,并与Cas9 mRNA一起共注射至斑马鱼胚胎单细胞期的胚胎内。随机挑选发育72h胚胎提取基因组DNA进行PCR分析,结果表明:除了有野生型DNA带外,部分胚胎有一条比野生型DNA小的带;进一步将F0代阳性个体与野生型的斑马鱼杂交,对杂交后代进行基因型分析,并成功筛选到缺失48bp(Δ48bp)的稳定遗传突变的gpr98基因敲除斑马鱼模型。该试验模型的构建为研究gpr98基因在心血管以及骨骼等组织器官的发育及相关疾病发生中的作用奠定了重要基础。
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| 关 键 词： | 斑马鱼 CRISPR-Cas9 gpr98基因 |
Construction of Zebrafish gpr98 Gene Knockout Experimental Model |
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| DENG Ming,ZENG Yuqian,LIU Le,GUO Jifeng,DENG Yun,TANG Beisha. Construction of Zebrafish gpr98 Gene Knockout Experimental Model[J]. ACTA Laser Biology Sinica, 2019, 28(3): 258-263,269 |
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| Authors: | DENG Ming ZENG Yuqian LIU Le GUO Jifeng DENG Yun TANG Beisha |
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| Affiliation: | (Department of Neurology, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410006, Hunan, China;College of Life Sciences, Hunan Normal University, Changsha 410081, Hunan, China) |
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| Abstract: | DENG Ming;ZENG Yuqian;LIU Le;GUO Jifeng;DENG Yun;TANG Beisha(Department of Neurology, Xiangya Hospital, Central South University, Changsha 410006, Hunan, China;College of Life Sciences, Hunan Normal University, Changsha 410081, Hunan, China) |
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| Keywords: | zebrafish CRISPR-Cas9 gpr98 gene |
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