FMDV整联蛋白受体β1亚基的克隆及其配体黏附区多抗的制备 |
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作者姓名: | 杜平 尚佑军 马军武 贺延玉 孙晓林 刘湘涛 |
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作者单位: | 1. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点实验室,兰州,730046 2. 甘肃农业大学研究测试中心,兰州,730070 3. 甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070 |
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摘 要: | 采用RT-PCR技术从牛气管组织扩增出2400 bp的β1基因, 回收纯化连入PGEM-T载体, 测序.用Expasy软件对β1基因的抗原性进行分析, 选取胞外区334~861 bp的配体结合区与6×His融合, 在大肠杆菌中大规模诱导表达, 并经Ni2+亲和柱层析纯化.通过SDS-PAGE鉴定后, 应用纯化蛋白免疫新西兰家兔, 获得效价在1:12 800以上的多抗, Western blotting鉴定表明此抗体可特异性的与表达的融合蛋白作用.
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关 键 词: | 口蹄疫病毒 整联蛋白 β1亚基 配体结合区 多克隆抗体 |
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